ISSN: 2157-7013
Jitendra Kumar Chaudhary y Pramod C Rath
Las células madre mesenquimales (MSC) tienen forma de huso, son adherentes, clonogénicas, no fagocíticas, fibroblásticas y de naturaleza multipotente con la capacidad intrínseca de autorrenovación y proliferación. La médula ósea es la fuente más rica de MSC para estudiar los procesos subyacentes de proliferación, autorrenovación y diferenciación de múltiples linajes. Ha habido varios estudios para mejorar el método de aislamiento, propagación, caracterización y diferenciación de células madre mesenquimales de la médula ósea de ratón, pero ninguno es ampliamente aceptable. Debido a la falta de disponibilidad de un método universalmente aceptable de cultivo de MSC, se están realizando continuos esfuerzos en esta dirección. Aquí, informamos un método simple con algunas modificaciones sutiles con el objetivo de mejorar el método general de aislamiento, cultivo, propagación y diferenciación de MSC in vitro. Siguiendo este protocolo, hemos aislado MSC con morfología típica en forma de huso, como se muestra mediante microscopía electrónica de barrido. Estas células también mostraron expresión de marcadores específicos de MSC, CD29 (98,94 % ± 0,67 %), CD44 (84,27 % ± 7,77 %), Sca-1 (92,70 % ± 3,81 %) con una expresión insignificante de marcadores específicos de HSC. como CD45 (0,40 % ± 0,10 %), CD34 (0,15 % ± 0,05 %) y CD11b (0,45 % ± 0,15 %). También se descubrió que las MSC se diferencian en linajes mesodérmicos, como adipocitos, osteocitos y condrocitos, así como células similares a neuronas ectodérmicas. Además, las MSC mostraron una expresión basal diferencial de factores de transcripción asociados a la pluripotencia, como Oct4, Nanog, Sox2 y Myc. Sobre la base de los hallazgos anteriores, proponemos un protocolo simple que se puede usar para aislar, cultivar, propagar y caracterizar MSC multipotentes de la médula ósea de ratón con fines experimentales y de aplicación.