Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

Una plataforma celular robusta para el estudio de la transición epitelial-mesenquimatosa creada mediante la edición de genes

michal kielbus

Etransición pitelial-mesenquimatosa (EMT) y, su proceso inverso, transición mesenquimatosa-epitelial (MET) , son procesos fisiológicos que también juegan un papel importante en la enfermedad. La creciente evidencia correlaciona la EMT con el mal resultado de múltiples neoplasias, así como con la metástasis y la resistencia a los medicamentos. Por lo tanto, los mecanismos moleculares que regulan la EMT son un área importante de la investigación del cáncer y la orientación de fármacos. Para estudiar la EMT, se utilizan comúnmente diferentes sistemas de indicadores exógenos que pueden señalar cambios fenotípicos. No obstante, el uso de reporteros exógenos que no pueden describir eventos moleculares, incluida la interferencia de promotores alternativos, elementos reguladores o mecanismos epigenéticos que modulan la activación del promotor, hace que algunos datos no sean confiables. Tratando de superar esas limitaciones, desarrollamos y validamos una línea celular informadora modificando el gen endógeno VIMENTIN (un gen asociado con EMT) utilizando la tecnología CRISPR/Cas9 de edición de genes. Específicamente, incorporamos con éxito una secuencia de ADN que contenía un péptido de autoescisión seguido de una proteína fluorescente en marco con VIMENTIN en el genoma de las células de cáncer de pulmón H2170. Nuestros datos ilustran de manera única que las células reporteras de vimentina son un modelo confiable para estudiar EMT y MET. Las células reporteras de vimentina permiten la observación espaciotemporal de la plasticidad celular con respecto a su mesenquima/epitelial in vitro y en el futuro in vivo. Este es un modelo excelente para estudiar los mecanismos moleculares de EMT/MET, así como una plataforma sólida para detectar nuevos medicamentos contra el cáncer.