Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto
ISSN: 2157-7064
ISSN: 2157-7064
Ehuie Micael Bedikou, Rajan Logesh, Sebastien Lamine Niamke, Palaniswamy Dhanabal
Varios años de experiencia realizando cromatografía en columnas se han condensado en pautas sencillas y útiles para traducir los resultados de la cromatografía de capa fina (TLC) en cromatografía flash de gradiente o isocrática. El El presente estudio describe el uso de dicho protocolo con un cartucho de sílice Biotage SNAP KP-Sil de 10 g (21 mm ø 55 mm, 50 μm de tamaño de partícula), para purificar, en un solo paso, cuatro (4) péptidos a partir de extracto de proteínas crudas de Amaranthus germinado semillas de híbridos. El mejor sistema solvente utilizado fue una combinación de n-hexano (solvente B no polar del 5% al 0% final concentración) y una mezcla de disolventes polares (disolvente A) compuesta por acetonitrilo, n-butanol, ácido acético glacial y agua en proporción 0.9:2:1:1, respectivamente. La elución se realizó en fase normal con un gradiente lineal. Todo el destello El procedimiento de cromatografía tomó como máximo veinticinco minutos (25 min) y menos de un litro (750 ml) de solventes totales se utilizó. Los péptidos purificados denominados AhPA, AhPB, AhPC y AhPE mostraron una aparente homogeneidad en las placas de TLC. y rendimientos de purificación de aproximadamente 11,15 %, 10,38 %, 14,50 % y 17,25 %, respectivamente. Esta técnica innovadora proporciona una alternativa eficiente a los investigadores en la purificación de péptidos y participa en la reducción del desperdicio de disolventes, geles, tiempo y por tanto, dinero.