Ingeniería enzimática
Acceso abierto

abstracto

Un péptido humano protege contra la leucemia inducida por la terapia

R. Wiehe

El tratamiento del cáncer con doxorrubicina y etopósido aumenta el riesgo de reordenamientos en el gen de la leucemia de linaje mixto o de la leucemia mieloide/linfoide (MLL) [1-3], que abarca un gen de 7,3 kb región de punto de ruptura (MLLbcr) en el cromosoma 11 con un punto de acceso de 0,4 kb relacionado con la terapia [2]. Se demostró que la enzima mitocondrial endonucleasa G (EndoG) se acumula en el núcleo después del tratamiento genotóxico induciendo estrés de replicación donde escinde el MLLbcr [4]. Se diseñó un plásmido informador basado en GFP que imitaba los reordenamientos de MLLbcr [5] y se usó para seleccionar una biblioteca de péptidos de hemofiltrado liofilizado fraccionado de pacientes con insuficiencia renal crónica con el objetivo de identificar un péptido humano que impidiera los reordenamientos de MLLbcr. Por lo tanto, las células se pretrataron con péptidos seguido de exposición a etopósido o doxorrubicina y análisis FACS para detectar la reconstitución de GFP. Después de dos rondas de fraccionamiento cromatográfico y análisis espectrométrico de masas, identificamos un péptido que mitiga los reordenamientos de MLLbcr en diferentes tipos de células sin afectar el ciclo celular o la muerte celular (imagen). La microscopía de inmunofluorescencia y la inmunoprecipitación de cromatina revelaron que el péptido inhibía la acumulación de EndoG nuclear y la unión de MLLbcr, mientras que el péptido no influía en el daño general del ADN. En conjunto, describimos un péptido humano que previene los reordenamientos de MLLbcr al interferir con las funciones EndoG nucleares.