Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Papel de diferentes regiones de α-sinucleína en la interacción con el ácido graso cerebral DHA

Giorgia De Franceschi y Patrizia Polverino de Laureto

La α-sinucleína es una proteína involucrada en la enfermedad de Parkinson. Su interacción con los ácidos grasos poliinsaturados del cerebro está despertando un gran interés. Previamente, investigamos la interacción de α-syn con el ácido docosahexaenoico (DHA), y se observó un efecto mutuo entre la proteína monomérica y el ácido graso. α-Syn adquiere una estructura secundaria α-helicoidal con un rápido equilibrio entre su forma libre y la unida a lípidos. En la forma α-helicoidal, el segmento proteico 73-102 es flexible y no se caracteriza por una estructura persistente. DHA forma gotas de aceite en presencia de la proteína. Para investigar a nivel molecular la implicación de distintas regiones de la proteína en la interacción con el DHA, se prepararon especies de proteínas truncadas (syn1-99, syn1-52, syn57-102 y syn108-140) y se analizó su capacidad de interacción con el DHA. por dicroísmo circular y mapeo proteolítico. Los datos de CD mostraron que todos los péptidos, excepto el correspondiente a la región C-terminal, pueden adquirir una estructura alfa-helicoidal en presencia de DHA. La diferente relación molar polipéptido/DHA necesaria para alcanzar el plegamiento máximo y el diferente contenido de hélice final entre los dos péptidos N-terminales (syn1-99, syn1-52) y el péptido NAC (syn57-102) sugieren que la secuencia se repite. un papel importante en la transición α-hélice y, por lo tanto, en la interacción con DHA. Los experimentos de proteólisis mostraron que todas las especies truncadas son resistentes a la proteólisis en presencia de concentraciones saturadas de DHA, lo que indica que casi todos los residuos están involucrados en la interacción con el lípido. La región C-terminal, en cambio, parece modular solo la porción de la molécula enterrada en el compartimiento de lípidos. Además, también se analizó la capacidad de los péptidos para afectar el autoensamblaje del ácido graso, lo que demuestra que los péptidos que interactúan también cambian el estado físico del DHA, por el extremo N-terminal con carga positiva.