Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Análisis cuantitativo de 25-OH vitamina D mediante extracción líquida asistida y cromatografía líquida: espectrometría de masas

Eduard Rogatsky, Shaynah Browne, Min Cai, Harsha Jayatillake y Daniel Stein

Presentamos un método de LC/MS de bajo volumen de muestra para el análisis de 25OH vitamina D. El método requiere solo 40 µl de suero, es totalmente automatizable, rápido y sensible. El método se implementó con éxito para el análisis clínico de lactantes por deficiencia de vitamina D. El método de 6 min tiene un rango de sensibilidad de 2 a 100 ng/ml. Se validó un método de 3 min con un rango de 5 a 100 ng/ml. Se lograron análisis rápidos, bajo volumen de muestra y alta sensibilidad mediante la combinación de preparación de muestra de extracción líquida soportada, cromatografía UHPLC y columna cromatográfica de núcleo fusionado para la separación, y espectrometría de masas de alta sensibilidad para la detección. Hacemos hincapié en la importancia de la calidad de la preparación de muestras para análisis LC/MS robustos. Usando la preparación de muestras basada en SLE, usamos con éxito solo 40 µl de suero mientras logramos un LLOQ de 2 ng/ml. Encontramos a partir de muestras analizadas que los bebés de 3 a 12 meses de edad no tenían deficiencia de vitamina D, en comparación con los adultos. El nivel promedio de 25(OH)D3 en bebés fue de 57,3 en comparación con 38,0 ng/ml para adultos en una población de pacientes de Bronx, NY.