Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Respuestas MS/MS de cromatografía líquida en Lentinan para la caracterización de la estructura del polisacárido β-D-glucano de hongos

Ni Azreen Mohd Jamil, Noraswati Mohd Ni Rashid y Norasfaliza Rahmad

Se sabe que el lentinan, un polisacárido complejo β-D-glucano que se encuentra en el hongo Shiitake, tiene efectos medicinales tales como Propiedades anticancerígenas e inmunomoduladoras. El análisis del lentinano mediante la aplicación de instrumentos biotecnológicos de alta gama, como la espectrometría de masas, aún es limitado. En este estudio, se ha utilizado espectrometría de masas de cromatografía líquida: tiempo de vuelo cuadripolar (LC/MS Q-TOF) para optimizar la respuesta de MS/MS en la aclaración de las características del lentinano. El análisis se realizó utilizando el estándar de lentinano a diferentes concentraciones a través de diferentes combinaciones de cuatro tipos de columnas y cuatro tipos de tampones. Se aplicaron cuatro niveles de energías de colisión MS/MS o conocidas como disociación inducida por colisión (CID). Los datos presentados mostraron que el CID de MS/MS óptimo que generó los seis iones de producto de lentinan en la mayoría de las combinaciones de columna y tampón fue a 20,0 V. Combinación de columna de cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HILIC) Altima sin ningún tampón en fase móvil (AH ; NB) y la columna Hypercarb con la presencia de ácido acético al 0,1 % en la fase móvil (TH; AA al 0,1 %) respectivamente resultaron ser las mejores combinaciones entre otras combinaciones, ya que estas combinaciones fueron capaces de generar iones de producto de lentinano a una concentración de lentinano como tan bajo como 0,156 mg/ml. Esto sugirió que estas combinaciones de columna y tampón han brindado una buena sensibilidad para mejorar la eficiencia máxima de lentinan a baja concentración, lo que se requería para alcanzar el umbral de abundancia de MS/MS. Como conclusión, las combinaciones adecuadas de columna y tampón son cruciales para mejorar la eficiencia máxima de lentinan a una intensidad de ionización óptima para permitir respuestas óptimas de MS/MS para dilucidar sus características estructurales. La determinación de la energía de colisión adecuada también juega un papel importante para generar espectros MS/MS de todos los iones de producto para el lentinano.