Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Aislamiento de plastoquinona de espinaca por HPLC

Marco Malferrari y Francesco Francia

Presentamos un método para la purificación de plastoquinona-9 (PQ), un cofactor de prenilquinona involucrado en la cadena de transporte de electrones fotosintéticos. Los procedimientos descritos se basan en el aislamiento de cloroplastos de espinacas seguido de extracción de PQ y fraccionamiento cromatográfico. La extracción de PQ se logró mediante la partición de la suspensión de cloroplastos con metanol:éter de petróleo. Este procedimiento eliminó grandes cantidades de pigmentos verdes del extracto y, por lo tanto, facilita el posterior aislamiento cromatográfico de PQ. Para obtener PQ puro, la extracción desarrollada se combinó con un enfoque cromatográfico de dos pasos utilizando fases estacionarias ortogonales, es decir, alúmina y octadecilsilano (C18). Se describe un protocolo a pequeña escala para la cromatografía líquida analítica de alto rendimiento en fase inversa (RP-HPLC), que puede implementarse en la mayoría de los laboratorios equipados con sistemas convencionales. La metodología reportada representa una herramienta valiosa para la producción rápida de pequeñas cantidades de PQ, para las cuales no existen estándares comerciales disponibles.