Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Determinación de Rottlerin, un inhibidor natural de la proteína quinasa C, en células de cáncer de páncreas y xenoinjertos de ratón mediante el método RP-HPLC

Qing-Yi Lu, Lifeng Zhang, Aurelia Lugea, Aune Moro, Mouad Edderkaoui, Guido Eibl, Stephen J. Pandol y Vay-Liang W. Go

Rottlerin es una cetona polifenólica natural aislada del pericarpio de Mallotus phillippinensis. En estudios anteriores demostramos que la administración parenteral de rottlerin redujo el crecimiento tumoral en modelos de xenoinjerto murino de cáncer de páncreas. El objetivo de este estudio fue desarrollar un método simple y validado para la determinación cuantitativa de rottlerina en plasma y tejidos tumorales de ratones alimentados con una dieta de rottlerina. Se preparó un modelo de xenoinjerto de cáncer de páncreas mediante la inyección subcutánea de 2 x 106 células HPAF-II en ratones desnudos. Una semana antes de la implantación del tumor, los ratones se asignaron al azar a una dieta estándar (AIN76A) y un suplemento dietético estándar con rottlerin al 0,012 % (n = 6 por grupo). Los ratones se sacrificaron después de 6 semanas con las dietas. Rottlerin se extrajo del plasma y los tejidos mediante precipitación-extracción de proteínas y se analizó mediante el método HPLC-DAD de fase inversa. También se aplicó el mismo método de HPLC para determinar los niveles de rottlerina en medios de cultivo acondicionados y en lisados celulares de células HPAF-II expuestas a una concentración de rottlerina 25 µM. Se detectó una cantidad sustancial de rottlerina en el tumor (2,11 ± 0,25 nmol/g de tejido) y plasma (2,88 ± 0,41 µM) en ratones alimentados con la dieta de rottlerina. Además, se detectaron niveles significativos de rottlerin (57,4 ± 5,4 nmol/mg de proteína) en lisados celulares de células HPAF-II tratadas con rottlerin. Estos datos indican que la rottlerina se absorbe eficazmente en las células y los tejidos tanto in vivo como in vitro y sugieren un fuerte potencial de la rottlerina como suplemento preventivo o adyuvante para el cáncer de páncreas.