Revista de ciencia y terapia celular
Acceso abierto

abstracto

Aplicación de Hipoxia para Establecer Modelos de Transición Epitelial-Mesenquimatosa en Líneas celulares de carcinoma de células renales

Baoan Hong, Changhua Zhou, Xin Du, Siqi Chen, Xiaohu Deng, Shayiremu Duoerkun, Qing Li, Yong Yang, Kan Gong y Ning Zhang

Propósito: Establecer modelos de transición epitelial-mesenquimatosa (EMT) en líneas celulares de carcinoma de células renales por hipoxia inducida por CoCl2.
Materiales y métodos: Las líneas celulares de carcinoma de células renales A498 y 786-O se utilizaron en el experimento y se utilizó CoCl2 para simular la hipoxia. Las células cancerosas se cultivaron con diferentes concentraciones de CoCl2. Se detectaron cambios de morfología y citoactividad para obtener la concentración óptima de CoCl2 para simular hipoxia. Después del tratamiento con CoCl2, las células se sometieron a análisis de transferencia Western para probar la expresión de HIF-1α; y los cambios de moléculas relacionadas con EMT (E-cadherina, fibronectina).
Resultados: Las conjunciones celulares de los grupos tratados con CoCl2 estaban sueltas y dispersas en comparación con el control. El efecto de CoCl2 sobre la viabilidad de las células A498 no fue distinto a una dosis baja, pero cuando la concentración de CoCl2 alcanzó los 250 mM, la actividad celular disminuyó gradualmente. Por el contrario, CoCl2 indujo la proliferación de células 786-O en el intervalo de 50 mM-200 mM, pero inhibió el crecimiento celular a dosis superiores a 200 mM. La expresión de E-cadherina se reguló significativamente a la baja, y la fibronectina se reguló al alza en las líneas celulares A498 y 786-O bajo hipoxia simulada con CoCl2 en comparación con condiciones normóxicas (P<0.01).
Conclusiones: Los modelos EMT de las líneas celulares de carcinoma de células renales se establecieron con éxito mediante hipoxia inducida por CoCl2. Los modelos nos ayudarán a seguir estudiando los mecanismos de la EMT e investigar nuevos objetivos terapéuticos para inhibir la invasión tumoral y la metástasis.