Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Un método de espectrometría de masas en tándem de cromatografía líquida sensible y libre de interferencias para medir metanefrinas en plasma

Jessica Gabler, Chao Yuan, Witold Woroniecki, Huafen Liu y Sihe Wang

Antecedentes: Las metanefrinas plasmáticas son los principales biomarcadores utilizados para ayudar en el diagnóstico de feocromocitoma. Sin embargo, los bajos niveles fisiológicos de metanefrinas, las propiedades fisicoquímicas y las posibles interferencias dificultan lograr una alta sensibilidad y especificidad. En este informe, desarrollamos y validamos un método de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) sensible y libre de interferencias para medir las metanefrinas en plasma con una preparación de muestra simple.

Métodos: las muestras de plasma se extrajeron con cartuchos de extracción en fase sólida de intercambio catiónico débil y se analizaron mediante LC-MS/MS con un tiempo de ciclo analítico inferior a seis minutos.

Resultados: Se observó supresión absoluta de iones y efecto matriz, sin embargo, fueron completamente compensados por los estándares internos. La epinefrina, un interferente isobárico de la normetanefrina, se separó cromatográficamente y no se observó interferencia con otros interferentes comunes. El método fue lineal de 0,08 a 22,2 nmol/L para normetanefrina y de 0,03 a 8,2 nmol/L para metanefrina con una precisión que osciló entre 81 y 107 %. No se observó remanente hasta 56,8 nmol/L para normetanefrina y 8,7 nmol/L para metanefrina. Los CV intraensayo y totales estuvieron dentro del 6,8 % para la normetanefrina y del 5,2 % para la metanefrina para los tres niveles probados. Según la regresión de Deming, la comparación con un método de LC-MS/MS de referencia utilizando muestras de pacientes (n=40) mostró un
pendiente de 0,973, intercepto de 0,11 nmol/L y coeficiente de correlación de 0,9936 para normetanefrina y pendiente de 1,039, intercepto de -0,014 nmol/L y coeficiente de correlación de 0,9914 para metanefrina. La diferencia media fue del 3,5 % y del -1,6 % para la normetanefrina y la metanefrina, respectivamente.

Conclusión: Este ensayo LC-MS/MS es sensible y libre de interferencias para la cuantificación de metanefrinas en plasma